Pular
Melhores práticas para o armazenamento de peptídeos
Para preservar a integridade dos resultados laboratoriais, o armazenamento adequado de peptídeos é essencial. Práticas corretas de armazenamento podem manter os peptídeos por anos e protegê-los contra contaminação, oxidação e degradação, que podem torná-los, e consequentemente seus experimentos, inúteis. Embora alguns peptídeos sejam mais suscetíveis à degradação do que outros, conhecer e implementar as melhores práticas de armazenamento pode prolongar significativamente sua estabilidade e integridade, independentemente da composição.
Após o recebimento, é imprescindível manter os peptídeos refrigerados e protegidos da luz. Se forem utilizados imediatamente ou nos próximos dias, semanas ou meses, a refrigeração por curto período a 4 °C (39 °F) é geralmente aceitável. Peptídeos liofilizados costumam ser estáveis à temperatura ambiente por várias semanas ou mais; portanto, se forem utilizados dentro de algumas semanas ou meses, esse armazenamento geralmente é suficiente.
No entanto, para armazenamento a longo prazo (vários meses a anos), é preferível armazenar os peptídeos em um congelador a -80 °C (-112 °F). Ao armazenar peptídeos por meses ou mesmo anos, o congelamento é ideal para preservar a estabilidade do peptídeo.
Além disso, é importante evitar ciclos repetidos de congelamento e descongelamento. Isso pode aumentar a suscetibilidade do peptídeo à degradação. Também é recomendável evitar congeladores frost-free para armazenar peptídeos, pois as temperaturas podem flutuar bastante durante os ciclos de descongelamento.
Prevenção da oxidação e da contaminação por umidade
É imprescindível evitar a contaminação dos peptídeos com ar e umidade. A contaminação por umidade é especialmente provável de ocorrer quando um peptídeo é usado imediatamente após ser retirado do congelador. Para evitar a absorção de umidade do ar na superfície fria do peptídeo ou no interior de sua embalagem, deixe-o atingir a temperatura ambiente antes de abri-lo.
É crucial minimizar a exposição do peptídeo ao ar. Portanto, o recipiente do peptídeo deve ser mantido fechado o máximo possível. Após a remoção da quantidade necessária de peptídeo, o fechamento hermético do recipiente sob uma atmosfera de gás seco e inerte (como nitrogênio ou argônio) minimizará o potencial de oxidação do peptídeo restante. Peptídeos com sequências C (cisteína), M (metionina) e W (triptofano) são especialmente suscetíveis à oxidação pelo ar.
Como o descongelamento e o recongelamento frequentes, bem como a exposição ao ar, podem reduzir significativamente a estabilidade a longo prazo de um peptídeo, muitos pesquisadores preferem determinar a quantidade de peptídeo necessária para cada experimento e, em seguida, aliquotar essa quantidade em frascos separados, conforme necessário. Essa é uma medida preventiva muito útil contra a degradação do peptídeo.
Armazenamento de peptídeos em solução
A vida útil de soluções peptídicas é muito menor do que a de peptídeos liofilizados, e os peptídeos armazenados em solução também são vulneráveis à degradação bacteriana. Peptídeos que contêm Cys, Met, Trp, Asp, Gln e Glu na extremidade N-terminal em suas sequências têm vida útil especialmente curta quando em solução.
Contudo, se for absolutamente necessário armazenar os peptídeos em solução, devem ser utilizados tampões estéreis com pH 5-6, e a solução de peptídeos deve ser dividida em alíquotas para evitar congelamentos e descongelamentos repetidos. As soluções de peptídeos são geralmente estáveis por até 30 dias quando refrigeradas a 4 °C (39 °F), mas os peptídeos com instabilidade inerente devem ser mantidos congelados quando não estiverem em uso.
Recipientes para armazenamento de peptídeos
Os recipientes para armazenamento de peptídeos devem ser completamente limpos, transparentes e estruturalmente íntegros. Devem também ser resistentes a produtos químicos e ter o tamanho adequado para a quantidade de peptídeo contida neles. Tanto frascos de vidro quanto de plástico são comumente utilizados; os frascos de plástico variam entre os compostos de poliestireno e os de polipropileno. Os frascos de poliestireno são geralmente transparentes, mas não resistentes a produtos químicos; já os frascos de polipropileno são geralmente translúcidos, mas resistentes a produtos químicos.
Embora os frascos de vidro de alta qualidade ofereçam todas as características desejáveis para o armazenamento de peptídeos, estes às vezes são enviados em frascos de plástico para evitar quebras. Mesmo assim, os peptídeos podem sempre ser transferidos de um recipiente de plástico para um de vidro ou vice-versa, se necessário.
Diretrizes para o armazenamento de peptídeos: dicas gerais
Ao armazenar peptídeos, lembre-se de:
• Armazene o peptídeo em local frio, seco e escuro.
• Evite o congelamento e descongelamento repetidos do peptídeo
. • Evite exposição excessiva ao ar.
• Evite a exposição à luz.
• Evite armazenar peptídeos em solução por longos períodos.
• Aliquote o peptídeo de acordo com as necessidades experimentais.